батофенантролин (4,7-Diphenyl-1,10-phenanthroline ) Германия C24H16N Мм 332.41 ====
Определение железа по цветной реакции со спиртовым раствором батофенантролина
Принцип метода определения железа крови по цветной реакции со спиртовым раствором батофенантролина
Сывороточное железо восстанавливают тиогликолевой кислотой, белки
осаждают трихлоруксусной кислотой, в фильтрате устанавливают нужную
величину рН, добавляя ацетат натрия, и проводят цветную реакцию с
батофенантролином.
В связи с тем, что он в воде не растворяется, используют спиртовой раствор.
Необходимые реактивы для определения железа по цветной реакции
1. Кислота тиогликолевая, кислота трихлоруксусная, раствор 400 г/л.
2. Натрия ацетат, насыщенный раствор (в случае необходимости его
очищают от следов железа, растворяя 500 г в 1 л воды при 37 °С). К
прозрачной надосадочной жидкости добавляют раствор батофенантролина из
расчета 10 мл на 1 л и этиловый спирт в количестве, равном количеству
надосадочной жидкости; на холоде выпадают кристаллы CH3COONa · ЗН2О.
3. Батофенантролин, 40 мг в 100 мл этанола.
4. НСl 1 н раствор.
5. Калибровочный раствор железа: 100 мг мягкой железной проволоки
растворяют в 4 мл концентрированной НС1 и разводят до 1 л водой,
получается раствор, содержащий 100 мкг/мл. Из него разведением в 60 раз
получают раствор, содержащий 30 мкмоль/литр (1,67 мкг/л).
Учитывая, что метод определения очень чувствительный, необходимо принять
все меры, чтобы реактивы и посуда не содержали железа, присутствие
которого выявляется при постановке холостых проб. Посуду, в том числе
пробирки для взятия крови, необходимо обрабатывать разбавленной НС1;
должна использоваться только деионизированная или перегнанная в
стеклянной посуде вода; реактивы очищаются перекристаллизацией.
Ход определения железа по цветной реакции
К 0,7 мл сыворотки прибавляют 2 капли тиогликолевой кислоты,
взбалтывают, а затем еще 0,35 мл 1 н НС1, опять перемешивают и
прибавляют 0,2 мл раствора трихлоруксусной кислоты. Энергично
размешивают стеклянной палочкой в течение 45 секунд, а затем
центрифугируют при скорости 2500 об./мин. В пробирку с притертой пробкой
отбирают из надосадочной жидкости 0,7 мл, к которым прибавляют 0,6 мл
насыщенного раствора аммония ацетата и 0,7 мл раствора батофенантролина.
Окраска развивается за 20—30 секунд. Фотометрируют в кювете с длиной
оптического пути 1 сантиметр при длине волны 536 нм против холостой
пробы, в которой вместо сыворотки берут 0,7 мл воды. Одновременно
обрабатывают и калибровочную пробу, в которой вместо сыворотки
используют 0,7 мл калибровочного раствора, содержащего 30 мкмоль железа в
1 литре.
Расчет проводят по правилу пропорций.
має статус перевіреної компанії
Це означає, що компанія надала Порталу Оголошень своє свідоцтво державної реєстрації. Актуальність цього свідоцтва перевірена по офіційній базі “Єдиного державного реєстру”. Надання свідоцтв не є обов’язковим для користувачів Порталу Оголошень. Тому відсутність перевірки в інших учасників не свідчить про їх ненадійність.